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3730XL测序基本流程
篇一:3730xl
3730测序
篇二:3730xl
3730测序仪操作流程
打开电脑，打开机器，待建立连接后，双击桌面图标“DC”。 待“Service Console”四个指示灯，全部变红后，自动显示操作窗口。
1预备阶段
换胶、换Runing buffer、Water。
胶从四度冰箱中取出，添加至原来的胶瓶中。少量多次，避免浪费。
Buffer 一般三天换一次，最长一周一次。主要是阳极杯 和buffer槽（阴极）。 Water、Waste槽中均换新鲜纯净水。 关闭舱门。
2 样品准备
按照BigDye? Terminator v3.1 Cycle Sequencing Kit说明书。
3 操作 Module mangager
点击进入后，根据毛细管长度，胶的类型及应用适当填写，如“3730_Seq_36cm_Pop7”。 Type选择 regular，Template选择StdSeq36_Pop7，也可略有改动。点击OK，保存。
Protocal manager
点击进入，Instrument protocal点击的New，键入Name，命名规则如上一步所示。 Run moduler选择在Module manager 所建立的 Type选择Regular dye set选择bigdye3.1, 点击OK
在analysis Protocal中点击New，键入名字，其他保持默认值，也可根据需要略微改动。 点击Plate manger>new>出现一个对话框，Application选择sequence analysis,Plate type 选择96孔板，Sealing 选择speta，其他根据实际情况填写，点击OK进入下一步。
键入Sample名字，选择Results group 地址 ，Instrument protocal，analysis Protocal均选择在上一步中建立的。选中RG 、IP、AP在Edit中选择Fill down?(96/48)点击OK 。 在Run schduler选中刚刚建立的Plate。
Search all通过Search 或者Find all进行寻找，找到后，选中，单击Add。 此时所编写的板子会出现在Input Stack中，选中点击菜单栏中的绿色箭头。
数据分析：在result group中寻找结果，并用sequence analysis软件进行分析。
关机：关掉软件窗口，待service console中四个指示灯全部变红后，关掉控制台。整个过程中控制台，一直开着，不要关闭。 关闭机器及电脑的电源。
3730DNA分析系统的技术特点： ?
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? 双光束双侧激光激发，后置超薄CCD 全自动上样系统 内置条形码阅读器 自动碱基识别与质量评分软件 最新推出POP-7液体分离胶 良好的温控装置提供了更大的温控范围（18~70℃）
3730DNA分析系统用于DNA测序的主要优点：
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? 电泳温度可达70℃，有助于去除二级结构的影响 良好温控装置保证片段分析准确性及重现性好 新的液体分离胶(POP~7TM Polymer)使通常读序长度即可达800bp
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? 新型碱基识别与质量评分软件，提高测序准确性 毛细管内荧光检测，灵敏度高 双光束双侧激光激发，荧光信号强度高度均一 高灵敏度提高了测序模板DNA的浓度范围 ABI 3730XL 测序仪为满足测序用户对大规模测序节省时间、降低成本和操作复杂性的要求，
Applied Biosystems 推出新的3730XL 系列DNA分析仪。3730xl 采用最新的光路系统设计，结合更优化的试剂组合和全自动化操作流程，在提高产率、提高数据质量的同时最大限度的降低试剂的消耗。应用3730 测序平台分离胶的用量可以节省30倍，反应缓冲液节省200倍，荧光染料只需要原来浓度的一半，3730xl由于致力于改进影响测序质量的最关键因素，所以能够提供给您更快更准测序成本更低的操作平台。
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? ABI全自动DNA测序仪（遗传分析仪）的详细介绍 3730xl的主要特点： - 双光束双侧激光激发，光栅分光装置和后置超薄CCD检测成像系统 - 内置一体化自动进样器及样品孔打孔装置
- 内置样品板条形码自动识别
- 100次（9600个样品）运行试剂一次上机
- 自动碱基识别与质量评分判定
- 最新推出POP-7液体分离胶，动态内镀毛细管壁
- 电泳温度范围18-70C
3730xl 主要好处
- 高质量测序结果
? 电泳温度70C，去除二级结构的影响
? 新型分离胶，可测1100碱基测序长度。
? 新型碱基识别与质量评分软件，提高测序准确性
- 最高灵敏度的光路系统
? 毛细管内荧光检测
? 后置超薄CCD检测系统
? 双光束双侧激光激发，荧光信号强度高度均一
? 高灵敏度提高检测DNA的浓度范围
- 超低成本测序平台
? 高灵敏度减少DNA和测序试剂的使用量。
? 胶使用量比3700少30倍
? 高成功率及长读结果减少非电泳相关的整体项目成本
? 更高的自动化减少劳力成本及人为失误的成本
高通量减少仪器折旧，人力及维护的平均成本
3730xl产率分析
测序模式毛细管电泳时间读序长度每天产率
短片段测序36 cm36min500bp1,728,000 bp
快速测序36 cm60min700 bp1,440,000 bp
标准测序36 cm90min800 bp1,113,000 bp
长片段测序50 cm120min1100 bp1,002,000 bp
规格指标:
激光：氩离子激光光源，激发波长为488nm和514.5nm
电泳电压：高达20kV
运行温度：18℃到70℃
计算机要求
硬件： PentiumⅣ处理器
操作系统：Windows ?2000
内存： 1GB
硬盘： 72GB硬盘
显示器：17寸彩色显示器
运行环境3730xl。
室温：18－30℃
湿度：20％－80％
主电源
电压：200－220伏或230－240伏+/-10％ 50/60HZ +/-10%|
电流：最大15安培
最大电源功率：2000瓦
仪器尺寸
宽度：100cm
深度：73cm
高度：89cm
重量：180kg
双脱氧链终止法原理
双脱氧链终止法又称为Sanger法，其原理是DNA模板在DNA聚合酶、引物、四种脱氧核苷酸三磷酸（dNTP）存在下进行复制时，在四管反应体系中分别按一定的比例引入四种双脱氧核苷三磷酸（ddNTP）。由于ddNTP缺乏延伸所需要的3’-OH基团，当ddNTP掺入链的末端时，该链就会停止延伸。如此每管反应体系中就产生了一系列长度不等的以ddNTP为3’端的DNA片段。反应终止后，分4个泳道进行凝胶电泳以分离长短不一的DNA片段，相邻的片段长度相差一个碱基。经放射自显影后，根据片段3’端的双脱氧核苷酸，便可获得合成片段的碱基排列顺序。
ABI3730XL测序仪技术原理
ABI3730XL自动测序仪是基于毛细管电泳和荧光标记技术的DNA测序仪。3730XL测序仪拥有96道毛细管，并用荧光标记代替了Sanger法中的同位素标记，从而大大提高了DNA测序的速度和准确性。4种双脱氧核苷酸（ddNTP）的碱基分别用不同的荧光进行标记，在通过毛细管时，不同长度的DNA片段上的4种荧光基团被激光激发，发出不同颜色的荧光，被CCD检测系统识别，并直接翻译成DNA序列。
ABI3730xl型测序仪日常维护标准操作规程(SOP)
篇三:3730xl
北京BUNNY工作组
ABI3730xl型测序仪日常维护标准操作规程(SOP)
每天
每星期
每月
每年
需要时
3730 特点、性能分析
篇四:3730xl
一． ABI 3730基因分析仪的硬件
硬件：采用光栅分光，CCD摄像机成像技术，十年实现实时全波长荧光同时荧光检测。
（1） 光栅全波长同时分析--灵敏度高，支持4色或5色荧光基因分析。更换或增
加荧光标记硬件无需调整。
（2） 低温CCD检测成像系统，灵敏度更高，信躁比更好。
（3） 全过程实时检测，灵敏度高。试剂可16倍稀释使用。 （4） 自动进样，48小时无人监管操作。
（5） ABI3100由于采用光栅CCD全波长实时检测因而可进行1小时一批的快速测
序。而其他公司仪器因滤光片转动造成检测时间损失，而无法加快电泳速度，以免造成碱基的漏检。
二． ABI 3730基因分析仪的软件
ABI 公司有十几年的软件设计及应用经验，提供丰富的应用软件 ，为不同研究领域人员提供全面而专业的服务，且所有基本分析软件和高通量自动分析软件都已经在不同操作平台得到应用验证，确保分析的可靠性和准确性。 1、基本分析软件
数据收集软件：Data Collection 基因序列分析软件：Sequense Analysis 基因片段分析软件：Genescan
2、高通量自动分析软件
（1） 基因型自动分析软件：Genotyper
（2） 基因序列拼接及比较分析软件：SeqScape软件 （3） 高通量基因片段分析软件：GeneMapper 2.0
数据库：内置Oracle 数据库。
三． ABI 3730基因分析仪的试剂
1． ABI荧光标记技术的优势：
（1） 荧光强度，强度均一，具有能量转移功能，能保证试剂可稀释16倍使用 （2） 荧光光谱之间互不干扰 （3） 荧光分子的电泳行为的一致性
（4） 荧光稳定性强
（5） 四色荧光一个泳道或-五色荧光一个泳道，可升级至更多色荧光。 2． 荧光分子： rodamine,d-rodamine,BigDye, BigDye 2.0, BigDye 3.0, dGTP Kit 3． ABI专利的荧光标记分子： LIZ,VIC,NED,JOE. 4． 先进的专利荧光标记技术的应用
（1） 支持杂合子测序，SNP位点发现及外显子再测序。
（2） 支持长片段测序，支持困难模板的测序：如：dGTP Bigdye 试剂盒
（3） 支持一个泳道十个SNP位点同时分析
（4） 荧光能量转移技术，试剂可16倍稀释，测序成本大大降低。 5． 工具试剂盒及一系列商品化应用的试剂盒：
(1) 测序试剂盒: 常规测序试剂盒: Bigdye3.0
困难模板测序试剂盒:dGTP Bigdye3.0
PolyA、T测序试剂盒
(2) 片段分析试剂盒: MultiPlex SNaPshot.: 提供单管即速反应试剂，可在一个反
应管内同时扩增多至10个SNP位点；引物无需荧光标记，用户可根据实验需要随时设计低成本的引物进行SNP的检测；多重SNP实验无须考虑各位点在染色体上的位置，即使SNP位点相邻1个碱基，都能准确辨别。适用于高通量的SNP验证及中通量的SNP筛选
(3) 动植物育种，性状相关基因克隆，品种鉴定的AFLP试剂盒： (4) 细菌鉴定，1000多种细菌鉴定Microseq ID： (5) 真菌鉴定，800多种霉菌鉴定Fungal ID：
(6)其他多种商品化应用试剂盒以保证不同科研或检验领域应用如：用于器官移
植，脐血库和骨髓移植的HLATyping: 用于判断指导临床鸡尾酒疗法用药的HIV Typing,用于亲子鉴定，法医鉴定,刑事破案的Human Identification试剂盒等等.
四． ABI 3730基因分析仪的性能分析
3730测序产率分析
测序模式 短片段测序 快速测序 标准测序 长片段测序
3730片段分析产率（LMS v2.5 kit）
染料 G5
毛细管 36 cm
电泳时间 30min
每天样品数 2，304
每天产率 46,080 基因型
毛细管 36 cm 36 cm 36 cm 50 cm
电泳时间 36min 60min 90min 120min
读序长度 500bp 700 bp 800 bp 1100 bp
每天产率 864,000 bp 720,000 bp 556,800 bp 501,000 bp3730xl。
五． ABI 3730基因分析仪的应用好处
1． 自动化程度高：3730提供连续、无需监控的操作，48道毛细管同时进行自动灌胶、
上样、电泳分离、检测及数据分析，可连续运行48小时无需人工干预。
2． 样品分析量大： 一束毛细管可同时对48个样品进行全自动分析，有四种测序模
式和多片段分析模式可供选择。一天可完成1920个样品的测序（快速测序模式） 和2304个样品的基因型分析工作（SSR）。
3． 快速、高通量测序性能：每天最高产率高达864,000 bp（快速测序模式），长片段
测序模式测序读长为1100碱基。且保证精度为98 .5%。
4． 先进的荧光检测系统：采用光栅分光，CCD摄像机成像技术，实现多色荧光同时
检测，与传统的滤镜及光电倍增管的检测方式相比，光栅及CCD的优势在于更新
荧光化学时无需更换任何硬件设备。
5． 全波长检测，可以同时检测各种荧光染料。兼容五色荧光对于微卫星分析与SNP
研究特别有用：可以用一色荧光作为分子量Ladder标记，其余四色可用于标记更多的SSR位点的扩增产物。实现了单管多重检测的目的。使片段分析的通量大大提高。如适用于高通量的SNP验证及高通量SNP筛选的MultiPlex SNaPshot试剂盒。
6． 双光束激光双侧激发48根毛细管的专利技术，大大提高荧光检测灵敏度和均一
性。灵敏度高，染料试剂可1：16倍以上稀释，可以快速测序。3730xl。
7． 50um内径毛细管,内壁无涂层, 专利液体胶，灌胶时自动同时内涂毛细管内壁。使
用寿命长。专利液体胶分离效果好，且胶粘度低，不宜堵毛细管.。不同长度毛细管22cm,36cm,50cm,支持不同实验的要求，毛细管指标300次,实际可使用600~1000次以上,
8． 应用广泛： ABI Prism? 3730遗传分析仪能够完成新基因测序或比较测序工作。
因峰高均一特别可进行杂合子测序，适用于SNP新发现。此外，可进行多种片段分析，包括微卫星DNA分析、比较基因型分析、单核苷酸多态性（SNP）研究。
精选表白签名,爱情表白签名感人
篇五:3730xl
1、 我的命是父母给的，我的心是你给的。
2、 【何志强，我爱你.】
3、 "我不知道我为什么喜欢你,就像我无法描述水是什么味道,但我知道我需要你,就像我需要水一样."
4、 我的少年，拥有世间最温柔的眉眼。
5、 满了400我就去表白好吗，给我力量好吗？
6、 张梦雨我爱你
7、 想你一生也爱我一个。
8、 等千方百计舞蹈过了后，我要向他表白。K.
9、 是假的我也会感动
10、 天旋地转，兵荒马乱，youaretheone
11、 张彩茹，我爱你一定爱到海枯石烂永远不后悔
12、 你以为秒赞是巧合啊你是我的特别关心啊
13、 我爱李叶，一直爱。叶叶，我等你。
14、 陪伴是最长情的告白！
15、 我爱你你不知道么？
16、 "我以大冒险的名义表白后他没当我选的真心话,,"
17、 郑仁义，我爱你
18、 有胃病的姑娘你们要记得按时吃饭按时睡觉好好照顾自己，因为我知道胃病发作时疼到极致的感觉。
19、 我没什么想说的，我喜欢你
20、 "有多少人,还在等待自己喜欢的那个TA，尽管明知道没有结果.却一如既往不求回报的付出."
21、 如果有一天你穿戴整齐成了别人的新郎我会闭口不提往日的时光XZ
22、 我不会没出息到和你分手后还希望你过得比我好
23、 丁士胜、我爱你
24、 我爱的人对我说我是他的命。。
25、 亲爱的，我把晚安放这儿，快睡吧。
26、 你是我的，我的还是我的，因为我是你的。
27、 我们不是恋人但你对我很重要你肯定知道我说的是你
28、 我爱曾淑怡我想让他看见-
29、 多么希望有那么一天，你拒绝所有的异性，只为等我。XL
30、 我喜欢你，所以你不要喜欢别人。
31、 [吴世勋，我爱你]
32、 你不要懂你不会懂你不能懂这是我不能说的秘密
33、 爱，需要我付出十万倍的努力。
34、 亲爱的深夜想你睡不着*
35、 我深碍你呢
36、 我爱他，轰轰烈烈到绝望。
37、 李敏仪。我爱你。
38、 "我喜欢你主动找我,这样我就确定你不会嫌我烦。"
39、 等一下，你愿意和我携手告别高中时代吗。
40、 男人，我真的很爱你，两年后就结婚，你愿意吗？
41、 怕冷吗，手借你牵啊。
42、 我在未满二十岁的年纪，爱着一个直到八十岁想起来都会微笑的人。
43、 我知道你看不见我发的这条不过我还是要发
44、 陈一鉴我欢喜侬大家帮帮忙让他看见
45、 如果累就放弃那我没资格喜欢你
46、 有一些零散的文字，凑成了一段无言的独白。
47、 我爱的人姓李，你呢？
48、 我喜欢你的名字还有你爱笑的样子
49、 我喜欢你，只是喜欢而已
50、 抓紧我然后带着我走
51、 我爱你，也只能在这里说说而已
52、 我爱的那个你可不可以也爱我
53、 是我表现太明显，让你害怕了么
54、 只爱一个太傻，爱上两个起码，三个伍个不多，十个八个潇洒。可我呢?实在是太傻太傻!虽然我很傻，可是我很温
55、 [嘿，此条过百我遍去告白，男神很有爱]
56、 这辈子最疯狂的事，就是爱上了你，最大的希望，就是有你陪我疯一辈子……任何事我都想与你分享!
57、 嫁给我吧!嫁给我以后，我就是世界上第二幸福的人。因为世界上第一幸福的人就是你!
58、 就像月亮有引力一样，人与人的相遇也有引力。我们的相遇是命中注定。让我们彼此相伴，共同走过今后的人生。
59、 我一直都在爱你。
60、 权志龙我男神。
61、 [你的出现，是我唯一的心动]
62、 [你可知你对我来说是个意外的惊喜]
63、 去见你想见的人，趁阳光正好，趁微风不噪，趁她还在，趁你未老。.
64、 我想要你给我从蓝色校服到白色婚纱的爱情，可以么？、
65、 给不了你感动但我可以爱你很久(闪点情话网)
66、 我希望不论在未来的哪一天，我都能有资格以最不容置疑的姿态站在你身边。
67、 ［我会爱你好久好久到时光不朽］
68、 我爱你，却不敢说出口
69、 最烂漫的表白莫过于“我看上你了”
70、 你眼睛会笑弯成一座桥
71、 我爱你，却不敢告诉你
72、 影子.当你在街上摇摇晃晃走的时候也许你没注意到我就在你身后
73、 想你的夜，多希望我能在你身边。
74、 爱你有错吗&如果有错，我想一直错下去！
75、 我希望，在我们十八岁那年，我们会很幸福地在一起。（路过的路人祝福我们可好？）
76、 我想你，想见你，想疼你，想宠你，因为，我喜欢你
77、 我在乎你的一切唯独不在乎爱了你多久
78、 我爱你，仅此而已
79、 我要嫁的不是王子，而是一个把我当公主的人
80、 男神是因为脸好看才会被我们喜欢，我们又凭什么让男神不去因为脸而喜欢上别人，又凭什么指望他能喜欢你
81、 天天喜欢田亮，森蝶喜欢张亮，“佳偶天橙”真是“天森一对”啊！不是一家太可惜了，“二亮爸爸，天森一家”
82、 天天既然你那么喜欢田亮那就娶了森蝶让他做你老丈人吧，森蝶既然你那么喜欢张亮那就嫁给天天让他做你公公吧
83、 “我们来交换礼物好不好”“好啊”“嗯好现在开始我是你的你是我的”
84、 “爱或者不爱给我一个字的答复”“不爱”“你数学不好吗重来”